ELISA

0
10

ELISA / ELISA / ELISA. [^cronim engL: Enzyme Linked Immunosorhent Assay = test de imunoadsorfifie. cu anticorpi marcati enzimatic.} Metoda de mare sensibilitate utilizata pen- tru detectia si masurarea unor cantitati foarte mid de proteine sau de alte substante cu proprietati antigenice. ELISA se ba-zeaza pe reactia antigen-anticorp, unui din cei doi component! fiind fixat pe un suport solid (suprafata unei placi, o cupa mica transparenta). Legarea celuilalt component este pusa In evidenta cu un anticorp specific cuplat la o enzima. Aditia sub-stratului enzimei declanseaza o reactie de culoare cantificabi-la. Ex.: pentru punerea In evidenta a anticorpilor anti-HIV, un antigen HIV (brut sau peptidic) este fixat pe o cupula transparenta. Serul de testat al unui subject este adaugat In dilutii succesive, apoi probele se spala. Pentru punerea In evidenta a complexelor antigen-anticorp se adauga un anticorp anti-imunoglobulina umana cuplat la *peroxidaza. Apoi se masoara densitatea optica a probelor prin spectrofotometrie. Cu cat con-centratia de anticorpi din serul pacientului este mai crescuta, cu atat si densitatea optica va fi mai mare. Proba va fi de-clarata pozitiva daca depaseste o valoare prag. In prezent se utilizeaza mai multe variante ale metodei ELISA, Indeosebi ELISA-competitie si ELISA-sandwich.